FonSuper DuRed 環保型核酸染料
(10000 × in water)
產品貨號:FS00501
保存條件:2-8℃避光干燥保存,有效期2年。
產品規格:500ul,500ul×10(棕色塑料管)
產品簡介:
1、無毒性:FonSuper DuRed獨特的油性大分子特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內,艾姆斯氏試驗結果也表明,該染料的誘變性遠遠小于EB。
2、靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
3、穩定性高:適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩定,耐光性強。
4、信噪比好:樣品熒光信號強,背景信號低,熒光強度是EB的十倍以上,肉眼可觀測到亮度明顯比EB強。
5、操作簡單:與EB一樣,在預制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
6、適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于dsDNA、ssDNA 或RNA染色。
7、完美兼容:與EB有相同的光譜特性,無需改變濾光片及觀察裝置:標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激發。但是FonSuper DuRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光完全激發,因此不推薦使用此類激發裝置的成像系統。對于此類裝置,我們推薦您使用FonSuper Green(#FS00601),它和FonSuper SYBR Green I(#FS00701)的光譜相似,靈敏度相當,但更加穩定。
使用方法:
1、膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1)制膠時加入FonSuper DuRed核酸染料(例如:每50 mL瓊脂糖溶液中加入5μL FonSuper DuRed 10,000×儲液,以此比例類推)。
(2)按照常規方法進行電泳。
注意事項:
此方法染色染料用量相對較少。500μL 染料大約可以做 100 塊 50mL 的膠。
由于FonSuper DuRed 具有良好的熱穩定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將FonSuper DuRed 加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。FonSuper DuRed 兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
2、泡染法
(1)按照常規方法進行電泳。
(2)用1×TAE/TBE將FonSuper DuRed 10000×儲液稀釋成1×染色液。(例如將5 μL FonSuper DuRed 10000×儲液加到50 mL1×TAE/TBE中)。
(3)將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的1×染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30 min左右,最佳染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5~10%丙烯酰胺的凝膠,染色時間通常介于30 min到1 h,并隨丙烯酰胺含量增加而延長。
注意事項:
用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
特別提醒:
如果您使用的是紫外成像儀,請選擇FonSuper DuRed(#FS00501);如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測,請選擇FonSuper Green(#FS00601)。在極少數情況下,質粒經某些酶切后的 DNA 樣品會出現拖尾和分辨率降低,此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。
注意事項:
- 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。
- 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。